反相高效液相色譜柱由于其分離效率高、選擇性好，檢測(cè)靈敏度高，操作自動(dòng)化，應(yīng)用范圍廣等特點(diǎn)成為廣大分析工作者的優(yōu)選分析方法。流動(dòng)相承擔(dān)液相分離作用的重要作用，是液相色譜柱系統(tǒng)的大腦。能否選擇合適的流動(dòng)相，影響整個(gè)分析工作的質(zhì)量。掌握流動(dòng)相選擇的理論知識(shí)對(duì)于分析工作者特別是藥物分析工作者是非常必要的。
選擇用于分析的合適的流動(dòng)相是一件難以確定和非常困難的任務(wù)。雖然沒(méi)有有關(guān)流動(dòng)相選擇的簡(jiǎn)易技巧、捷徑、竅門或秘訣，但卻有些理論來(lái)簡(jiǎn)化此過(guò)程，反相高效液相色譜流動(dòng)相一般是由水相和有機(jī)相組成。
反相高效液相色譜柱的物理性質(zhì)：
硅膠純度：硅膠純度對(duì)強(qiáng)極性化合物的分離較為重要，殘留金屬離子濃度、硅膠的雜質(zhì)會(huì)影響化合物的峰形，硅膠表面的金屬含量高會(huì)影響堿性化合物的峰形，易發(fā)生拖尾。
A型硅膠是由金屬硅酸鹽制備而來(lái)，具有很高的金屬含量，硅膠純度較低，可用作中性化合物和非離子化合物的分離。
B型硅膠是以無(wú)金屬的工藝制備而來(lái)，純度高、酸性較弱、只含有微量的金屬，可用于分離離子化合物、可電離化合物，特別是堿性化合物。
現(xiàn)在的色譜柱填料以B型硅膠為主，但是不同品牌、不同類型的色譜柱的硅膠表面金屬含量還是略有差別的，如果色譜峰形較差，需要關(guān)注不同品牌色譜柱的硅膠純度。
色譜柱尺寸：增加色譜柱長(zhǎng)度，可以在一定程度上提高柱效，但也會(huì)升高壓力和導(dǎo)致峰展寬；寬柱徑，提高載樣量，但也會(huì)增加橫向擴(kuò)散，同樣會(huì)導(dǎo)致峰展寬。窄柱徑可以節(jié)約溶劑，可減少橫向擴(kuò)散，但壓力較大，對(duì)系統(tǒng)要求較高。
